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1、離子交換劑的選擇選擇理想的交換劑是提高分辨率和有效成分獲得率的重要前提：選擇交換劑時應從如下幾方面加以考慮。首先要選擇對陽離子交換劑或陰離子交換劑，使被分離物質的電9荷與交換劑平衡離子的電荷正負性相同。對于兩性離子，應根據(jù)其在穩(wěn)定的pH范圍內所帶的電荷選擇交換劑。其次要對強弱離子交換劑進行選擇。離子交換層析中一般不用中強度的交換劑。強性離子交換劑常用于無離子水的制備和分離一些在pH時較穩(wěn)定的化合物。分離生物樣品習慣于弱性離子交換劑。第三要選擇平衡離子。為了提高交換容量，一...

一、凝膠過濾色譜的原理及其特點1、原理：凝膠過濾層析又稱凝膠排阻色譜,分子篩色譜法,凝膠過濾法等。利用凝膠過濾介質為固定相，根據(jù)物料中溶質相對分子質量的差異的液相色譜法。2、特點：（1）操作方便,條件溫和,不會使物質變性；（2）色譜介質不需再生,可反復便用。（3）分離效率高，回收率較高。（4）廣泛應用于生物大分子的初級分離，脫鹽等。（5）分辨率較低，需采用細長柱。（6）經(jīng)過凝膠過濾色譜后樣品被稀釋，上樣前需進行濃縮。二、凝膠過濾色譜的凝膠特性參數(shù)及其具體含義(1)排阻極限(e...

一、疏水層析概述疏水層析（HIC）亦稱為疏水作用層析，是利用固定相載體上偶聯(lián)的疏水性配基與流動相中的一些疏水分子發(fā)生可逆性結合而進行分離的層析技術。從作用機制來看，它屬于吸附層析。非極性化合物例如苯、環(huán)己烷在水中的溶解度非常小，與水混合時會形成互不相溶的兩相，即非極性分子有離開水相進入非極性相的趨勢，即所謂的疏水性(Hydrophobicity)。非極性溶質與水溶劑的相互作用則稱為疏水效應(Hydrophobiceffect)。疏水效應疏水作用(hydrophobicinte...

分配層析法是根據(jù)一種或多種化合物，在兩種不相混合的溶劑間的分配來分離物質的方法。相當于一種連續(xù)液一液萃取法。在一定溫度下，物質同時溶解于兩種相接觸的不相混合的溶劑中，其中一種溶劑吸收在支持物上，作為固定相，另一為流動相，化合物在兩相中的濃度之比是一個常數(shù):分配系數(shù)。一、分配層析法的原理：分配柱層析所用儀器，操作過程都與一般吸附柱層析法相同，柱內裝滿某種粉末狀物質的載體，在載體的表面上保持一種液相，這種液相并不移行，故叫固定相，將混合物樣品溶液倒入柱內后再用溶劑沖洗，此溶劑移行...

1、裝柱子：裝柱子（添硅膠）時，有兩種方法：即濕法裝柱和干法裝柱，二者各有優(yōu)劣。不論干法還是濕法，硅膠（固定相）的上表面一定要平整，并且硅膠（固定相）的高度一般為15cm左右，太短了可能分離效果不好，太長了也會由于擴散或拖尾導致分離效果不好。濕法裝柱是先把硅膠用適當?shù)娜軇┌鑴蚝螅偬钊胫又校缓笤偌訅河昧芟磩白咧印保痉ù蟮膬?yōu)點是一般柱子裝的比較結實，沒有氣泡。干法裝柱則是直接往柱子里填入硅膠，然后再輕輕敲打柱子兩側，至硅膠界面不再下降為止，然后再填入硅膠至合適高度，后...